Evaluación de dos crioprotectores en la congelación de embriones bovinos producidos in vitro, en medios sintéticos
El objetivo de esta investigación fue determinar el mejor crioprotector; para ser usado en un medio químicamente definido, sin compuestos biológicos, usando sustitutos sintéticos, capaz de mantener y/o mejorar los resultados de calidad embrionaria y sobrevivencia poscriopreservación de embriones pr...
| Main Author: | |
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| Other Authors: | |
| Format: | masterThesis |
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2016
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| Online Access: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/26153 |
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| author | Barba Cáceres, Edgar Mauricio |
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| description | El objetivo de esta investigación fue determinar el mejor crioprotector; para ser usado en un medio químicamente definido, sin compuestos biológicos, usando sustitutos sintéticos, capaz de mantener y/o mejorar los resultados de calidad embrionaria y sobrevivencia poscriopreservación de embriones producidos in vitro. Se utilizaron 176 embriones PIVE, provenientes de ovocitos de ovarios de matadero. Se agruparon en 2 grupos (n=85 y n=91), de 7 y 8 días, respectivamente y fueron sometidos a congelación lenta usando 6 diferentes medios que contenían dos crioprotectores: 1.5M de glicerol (GLY) y 1.5M de etilenglicol (ETY) combinados con tres compuestos: 0.4% de polivinilpirrolidone (PVP), 0.5mg/ml de ácido hialurónico (HA) y 0.4% de albumina sérica bovina (BSA). Se descongelaron y pusieron a cultivar para luego ser evaluados a las 24, 48 y 72 horas registrando las variables integridad de membrana, re-expansión y eclosión de los embriones. La integridad de la membrana plasmática fue similar entre crioprotectores suplementados con proteínas sintéticas, no obstante, la adición de BSA aumento el número de embriones de 7 días con membrana plasmática intacta en ambos crioprotectores, pero esta diferencia solo fue significativa con la combinación de etilenglicol más ácido hialurónico. La combinación de etilenglicol con ácido hialurónico o con albumina sérica bovina tuvieron porcentajes de expansión embrionaria más bajos y más altos respectivamente, y solamente entre estos tratamientos la diferencia fue significativa. Por lo tanto, el uso de proteínas sintéticas en los crioprotectores puede ser una alternativa efectiva para mantener los medios de congelación químicamente definidos y evitar los riesgos sanitarios |
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| institution | Universidad de Cuenca |
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| spelling | oai:dspace.ucuenca.edu.ec:123456789-261532020-08-03T15:12:48Z Evaluación de dos crioprotectores en la congelación de embriones bovinos producidos in vitro, en medios sintéticos Barba Cáceres, Edgar Mauricio Neira Solano, Jorge Alberto Tesis De Maestria En Reproduccion Animal Crioprotector Embrion Bovinos Produccion In Vitro Medios Sinteticos Sobrevida Poscriopreservacion El objetivo de esta investigación fue determinar el mejor crioprotector; para ser usado en un medio químicamente definido, sin compuestos biológicos, usando sustitutos sintéticos, capaz de mantener y/o mejorar los resultados de calidad embrionaria y sobrevivencia poscriopreservación de embriones producidos in vitro. Se utilizaron 176 embriones PIVE, provenientes de ovocitos de ovarios de matadero. Se agruparon en 2 grupos (n=85 y n=91), de 7 y 8 días, respectivamente y fueron sometidos a congelación lenta usando 6 diferentes medios que contenían dos crioprotectores: 1.5M de glicerol (GLY) y 1.5M de etilenglicol (ETY) combinados con tres compuestos: 0.4% de polivinilpirrolidone (PVP), 0.5mg/ml de ácido hialurónico (HA) y 0.4% de albumina sérica bovina (BSA). Se descongelaron y pusieron a cultivar para luego ser evaluados a las 24, 48 y 72 horas registrando las variables integridad de membrana, re-expansión y eclosión de los embriones. La integridad de la membrana plasmática fue similar entre crioprotectores suplementados con proteínas sintéticas, no obstante, la adición de BSA aumento el número de embriones de 7 días con membrana plasmática intacta en ambos crioprotectores, pero esta diferencia solo fue significativa con la combinación de etilenglicol más ácido hialurónico. La combinación de etilenglicol con ácido hialurónico o con albumina sérica bovina tuvieron porcentajes de expansión embrionaria más bajos y más altos respectivamente, y solamente entre estos tratamientos la diferencia fue significativa. Por lo tanto, el uso de proteínas sintéticas en los crioprotectores puede ser una alternativa efectiva para mantener los medios de congelación químicamente definidos y evitar los riesgos sanitarios The objective of this investigation was to determine the best cryoprotectant; To be used in a chemically defined medium, without biological compounds, using synthetic substitutes, capable of maintaining and / or improving the results of embryonic quality and survival after embryo preservation produced in vitro. A total of 176 PIVE embryos were obtained from oocytes from slaughterhouse ovaries. They were grouped into 2 groups (n = 85 and n = 91), 7 and 8 days respectively, and were subjected to slow freezing using 6 different media containing two cryoprotectants: 1.5M glycerol (GLY) and 1.5M ethylene glycol (ETY ) Combined with three compounds: 0.4% polyvinylpyrrolidone (PVP), 0.5 mg/ml hyaluronic acid (HA) and 0.4% bovine serum albumin (BSA). They were thawed and cultured and evaluated at 24, 48 and 72 hours for the variables membrane integrity, re-expansion and embryo hatching. Plasma membrane integrity was similar between cryoprotectants supplemented with synthetic proteins; however, addition of BSA increased the number of intact plasma membrane 7-day embryos in both cryoprotectants, but this difference was only significant with the combination of ethylene glycol plus hyaluronic acid. The combination of ethylene glycol with hyaluronic acid or with bovine serum albumin had lower and higher percentages of embryo expansion respectively, and only among these treatments the difference was significant. Therefore, the use of synthetic proteins in cryoprotectants may be an effective alternative to keep chemically defined freezing media and avoid sanitary risks Magister en reproducción animal Cuenca 2016-12-13T21:48:48Z 2016-12-13T21:48:48Z 2016 masterThesis http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/26153 spa TM4A;100 application/pdf application/pdf |
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