Evaluación del estado de desarrollo de hypericum laricifolium sobre metabolitos responsables de actividad antibacteriana utilizando fingerprint cromatográfico
El principal objetivo de este estudio fue investigar la influencia de las fases de desarrollo de Hypericum laricifolium sobre los metabolitos responsables de la actividad antibacteriana frente a Staphylococus aureus meticilino resistente (SAMR) utilizando la metódica de Fingerprint cromatográfico. U...
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2017
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| author | Tenesaca Sigua, Rodrigo José |
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| description | El principal objetivo de este estudio fue investigar la influencia de las fases de desarrollo de Hypericum laricifolium sobre los metabolitos responsables de la actividad antibacteriana frente a Staphylococus aureus meticilino resistente (SAMR) utilizando la metódica de Fingerprint cromatográfico. Un método de HPLC-DAD se desarrolló para separar los componentes presentes en las muestras de H. laricifolium mediante la optimización de las condiciones cromatográficas utilizando un diseño factorial 23. Se utilizó el método de mínimos cuadrados parciales, conocido por sus siglas en inglés PLS, (partial least squares) para establecer una correlación entre la actividad antibacteriana y los perfiles cromatográficos de los extractos de H. laricifolium a 254, 280 y 360 nm. Se construyó un modelo utilizando 30 muestras con 7501 variables (X) correspondientes a las respuestas obtenidas en el espectro UV en diferentes tiempos; las variables (Y) consistió en valores experimentales de concentración inhibitoria media (CI50) de cada extracto. Previo al análisis por PLS, los cromatogramas fueron sometidos a un pretratamiento por centrado de columnas. El modelo PLS fue aprobado por validación cruzada; su capacidad se evaluó utilizando los parámetros de correlación (R2) y la raíz del error medio cuadrático de predicción (REMCP). Los mejores resultados se lograron con el cromatograma a 254 nm (R2 = 0.90, REMCP = 2.25). En estas condiciones, el número de componentes óptimo (NCO) fue ocho. Finalmente, la prueba T de Student no mostró una diferencia significativa entre las actividades antibacterianas de los estadios joven y adulto de H. laricifolium. |
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| institution | Universidad de Cuenca |
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| spelling | oai:dspace.ucuenca.edu.ec:123456789-287892020-08-03T16:05:08Z Evaluación del estado de desarrollo de hypericum laricifolium sobre metabolitos responsables de actividad antibacteriana utilizando fingerprint cromatográfico Tenesaca Sigua, Rodrigo José León Tamariz, Fabián Actividad Antibacteriana Estadio De Desarrollo Vegetal Fingerprint Cromatografico Hypericum Laricifolium Minimos Cuadrados Parciales Tesis De Maestria En Biociencias Aplicadas El principal objetivo de este estudio fue investigar la influencia de las fases de desarrollo de Hypericum laricifolium sobre los metabolitos responsables de la actividad antibacteriana frente a Staphylococus aureus meticilino resistente (SAMR) utilizando la metódica de Fingerprint cromatográfico. Un método de HPLC-DAD se desarrolló para separar los componentes presentes en las muestras de H. laricifolium mediante la optimización de las condiciones cromatográficas utilizando un diseño factorial 23. Se utilizó el método de mínimos cuadrados parciales, conocido por sus siglas en inglés PLS, (partial least squares) para establecer una correlación entre la actividad antibacteriana y los perfiles cromatográficos de los extractos de H. laricifolium a 254, 280 y 360 nm. Se construyó un modelo utilizando 30 muestras con 7501 variables (X) correspondientes a las respuestas obtenidas en el espectro UV en diferentes tiempos; las variables (Y) consistió en valores experimentales de concentración inhibitoria media (CI50) de cada extracto. Previo al análisis por PLS, los cromatogramas fueron sometidos a un pretratamiento por centrado de columnas. El modelo PLS fue aprobado por validación cruzada; su capacidad se evaluó utilizando los parámetros de correlación (R2) y la raíz del error medio cuadrático de predicción (REMCP). Los mejores resultados se lograron con el cromatograma a 254 nm (R2 = 0.90, REMCP = 2.25). En estas condiciones, el número de componentes óptimo (NCO) fue ocho. Finalmente, la prueba T de Student no mostró una diferencia significativa entre las actividades antibacterianas de los estadios joven y adulto de H. laricifolium. The main objective of this study was to investigate the influence of the development phases of Hypericum laricifolium on metabolites responsible for the antibacterial activity against methicillin resistant Staphylococcus aureus (MRSA) using Chromatographic Fingerprint as methodology for modeling. An HPLC-DAD method was developed to separate the components present in H. laricifolium extracts by optimizing the chromatographic conditions, using a factorial design 23. The partial least squares (PLS) method was used to establish a correlation between the antibacterial activity and the chromatographic profiles of H. laricifolium extracts at 254, 280 and 360 nm. A model was constructed using 30 samples with 7501 X variables corresponding to the responses obtained in the UV spectrum at different times; the Y variables consisted of experimental values of inhibitory concentration 50% (IC50) of each extract. Prior to the PLS analysis, the chromatograms were subjected to a pre-treatment of column centering. The PLS model was validated by cross validation; their capacity was evaluated using the correlation parameters (R2) and the root mean square error prediction (RMSEP). The best results were achieved with the 254 nm chromatogram (R2 = 0.90, RMSEP = 2.25). Under these conditions, the optimal number of components was eight. Finally, the Student's T test did not show a significant difference between the antibacterial activities of the young and adult stages of H. laricifolium. Magíster en Biociencias Aplicadas Cuenca 2017-12-22T13:08:43Z 2017-12-22T13:08:43Z 2017-12-20 masterThesis Ensayos y artículos académicos o científicos http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/28789 spa TM4;1298 application/pdf application/pdf |
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