Evaluación de la eficacia de la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) en la determinación de la competencia de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero
El objetivo del presente estudio fue evaluar la eficacia de la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) para determinar la competencia de maduración, clivaje, y progreso al estado de blastocisto de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero. Los complejos cumulus ovocitos (COC´s: n= 2.340)...
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| Format: | bachelorThesis |
| Language: | spa |
| Published: |
2019
|
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| Online Access: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/32159 |
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| author | Duma Pauta, José Mauricio |
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| description | El objetivo del presente estudio fue evaluar la eficacia de la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) para determinar la competencia de maduración, clivaje, y progreso al estado de blastocisto de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero. Los complejos cumulus ovocitos (COC´s: n= 2.340) provenientes de 388 ovarios de matadero fueron recuperados por aspiración folicular, clasificados de forma tradicional con base a la morfología del ovocito y luego expuestos a 90 minutos a la tinción BCB. Se evaluaron tres tratamientos. G1: Testigo (sin exposición al BCB), G2: BCB+, G3: BCB-. Se determinó la morfometría antes y después de la maduración in vitro (MIV), la maduración morfológica de acuerdo a la expansión de las células del cumulus, la maduración nuclear, el porcentaje de clivaje, blastocitos y porcentaje global embriones (mórulas y blastocistos) al día 8. El 62,3% de ovocitos expuestos al BCB fueron positivos BCB+ (G2) y tuvieron un diámetro mayor antes (135,9 μm) y después (134,8 μm) de la MIV (p<0.05) que los ovocitos del grupo BCB- (128,1 y 127,6 μm) y el grupo Testigo o Control (129,0 y 128,2 μm). La maduración morfológica (expansión del cumulus) y la configuración meiótica de los diferentes estadios de maduración nuclear no fue diferente entre grupos (p>0.05). El porcentaje de clivaje fue significativamente mayor (p<0.05) en el grupo Testigo (43,4%) que el grupo BCB+ (33,5%). El porcentaje de blastocistos no varió entre grupos (p>0.05). (G1: 19,3%; G2: 24,8%; G3: 13,6%). Finalmente, el porcentaje global de embriones fue mayor en el grupo BCB+(52,6%) que el grupo Testigo (32,6%) y BCB- (33,5%). Los resultados establecen que la tinción azul brillante de cresilo permitió seleccionar ovocitos con mayor diámetro y volumen (BCB+), con nula o baja actividad de la enzima glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH); a pesar de que no permitió aumentar el porcentaje de maduración y clivaje, contribuyó a mejorar el porcentaje global de embriones obtenidos in vitro |
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| institution | Universidad de Cuenca |
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| spelling | oai:dspace.ucuenca.edu.ec:123456789-321592020-08-03T15:16:48Z Evaluación de la eficacia de la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) en la determinación de la competencia de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero Duma Pauta, José Mauricio Ayala Guanga, Luis Eduardo Azul Brillante De Cresilo Blastocistos El objetivo del presente estudio fue evaluar la eficacia de la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) para determinar la competencia de maduración, clivaje, y progreso al estado de blastocisto de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero. Los complejos cumulus ovocitos (COC´s: n= 2.340) provenientes de 388 ovarios de matadero fueron recuperados por aspiración folicular, clasificados de forma tradicional con base a la morfología del ovocito y luego expuestos a 90 minutos a la tinción BCB. Se evaluaron tres tratamientos. G1: Testigo (sin exposición al BCB), G2: BCB+, G3: BCB-. Se determinó la morfometría antes y después de la maduración in vitro (MIV), la maduración morfológica de acuerdo a la expansión de las células del cumulus, la maduración nuclear, el porcentaje de clivaje, blastocitos y porcentaje global embriones (mórulas y blastocistos) al día 8. El 62,3% de ovocitos expuestos al BCB fueron positivos BCB+ (G2) y tuvieron un diámetro mayor antes (135,9 μm) y después (134,8 μm) de la MIV (p<0.05) que los ovocitos del grupo BCB- (128,1 y 127,6 μm) y el grupo Testigo o Control (129,0 y 128,2 μm). La maduración morfológica (expansión del cumulus) y la configuración meiótica de los diferentes estadios de maduración nuclear no fue diferente entre grupos (p>0.05). El porcentaje de clivaje fue significativamente mayor (p<0.05) en el grupo Testigo (43,4%) que el grupo BCB+ (33,5%). El porcentaje de blastocistos no varió entre grupos (p>0.05). (G1: 19,3%; G2: 24,8%; G3: 13,6%). Finalmente, el porcentaje global de embriones fue mayor en el grupo BCB+(52,6%) que el grupo Testigo (32,6%) y BCB- (33,5%). Los resultados establecen que la tinción azul brillante de cresilo permitió seleccionar ovocitos con mayor diámetro y volumen (BCB+), con nula o baja actividad de la enzima glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH); a pesar de que no permitió aumentar el porcentaje de maduración y clivaje, contribuyó a mejorar el porcentaje global de embriones obtenidos in vitro The aim of the present study was to evaluate the efficacy of the Brilliant Cresyl Blue (BCB) test to determine the competence of maturation, cleavage and progress in the blastocyst status of bovine oocytes in slaughterhouse ovaries. The oocyte complexes (COC: n = 2,340) of 388 ovaries of sacrifice were recovered by follicular aspiration, formed in a traditional way with the morphology of the oocyte and then at 90 minutes of BCB staining. Three treatments were evaluated. G1: Control (without exposure to BCB), G2: BCB +, G3: BCB-. Morphometry was determined before and after in vitro maturation (IVM), morphological maturation according to the expansion of the cumulus cells, nuclear maturation, percentage of cleavage, blastocytes and the total percentage of embryos (morulas and blastocysts) on day 8. 62.3% of the oocytes in the BCB were BCB positive + (G2) and had a larger diameter before (135.9 μm) and after (134.8 μm) of the MIV (p<0,05) than the oocytes of the BCB group - (128.1 and 127.6 μm) and the Control or Control group (129.0 and 128.2 μm). The morphological maturation (group expansion) and the configuration of the different stages of nuclear maturation did not differ between the groups (p>0,05). The percentage of cleavage was significantly higher (p <0.05) in the control group (43.4%) than in the BCB + group (33.5%). The percentage of blastocysts did not vary between the groups (p>0,05). (G1: 19.3%; G2: 24.8%; G3: 13.6%). Finally, the general percentage of interest was higher in the BCB + group (52.6%) than in the Control group (32.6%) and BCB- (33.5%). The results establish that brilliant cresyl blue staining allowed to select oocytes with greater diameter and volume (BCB +), with no or low activity of the enzyme glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH); although it did not allow to increase the percentage of maturation and cleavage, it contributed to improve the overall percentage of embryos obtained in vitro Médico Veterinario Zootecnista Cuenca 2019-03-28T20:42:09Z 2019-03-28T20:42:09Z 2019-03-27 bachelorThesis http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/32159 spa TV;327 application/pdf application/pdf |
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