Evaluación de dos métodos de selección espermática por centrifugación y flotación de esperma canino epididimario fresco y criopreservado
El presente estudio evaluó dos métodos de selección de espermatozoides epididimarios de perros, uno por centrifugación en gradientes de densidad usando BoviPure (CGD-BoviPure), y otro por Swim-up. Se recuperaron muestras espermáticas de sesenta epidídimos mediante flujo retrógrado...
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| Format: | bachelorThesis |
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| Published: |
Universidad de Cuenca
2021
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| Online Access: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/36793 |
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| author | Jara Jimbo, Diana Isabel Paredes Quito, Efraín Bernardo |
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| description | El presente estudio evaluó dos métodos de selección de espermatozoides epididimarios de perros, uno por centrifugación en gradientes de densidad usando BoviPure (CGD-BoviPure), y otro por Swim-up. Se recuperaron muestras espermáticas de sesenta epidídimos mediante flujo retrógrado usando el diluyente TCG-YH (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% de yema de huevo) y se conformaron veinte pools (3 muestras/pool). La selección espermática se realizó en muestras frescas individuales (n=60) o muestras agrupadas (n=20), ya sea frescas, refrigeradas (24 h) o congeladas-descongeladas (C/D). En cada muestra, un grupo control (sin seleccionar) fue incluido. Todas las muestras fueron evaluadas su cinética-morfometría y la integridad de las membranas espermáticas mediante el sistema CASA, (SCA) y la prueba de fluorescencia PI/PNA-FITC, respectivamente. Los resultados demostraron que CGD-BoviPure fue más efectivo en seleccionar espermatozoides de perro que el Swim-up y control, basado en incremento de la cinética e integridad de membranas plasmática (IMP) y acrosomal (IMA). En muestras individuales, la selección por CGD-BoviPure incrementó (P<0,05) la motilidad total y progresiva (MP), velocidades curvilínea (VCL) y rectilínea (VSL), linealidad (LIN), oscilación (WOB), frecuencia de batida de flagelo (BCF), IMP e IMA. Sin embargo, en muestras agrupadas, la selección por CGD-BoviPure mostró ser efectiva sólo en muestras refrigeradas y C/D, incrementando (P<0,01) la MP, VCL, WOB e IMP. Eficientemente, la selección de los espermatozoides C/D mediante CGD-BoviPure no varió (P>0,05) las dimensiones morfométricas de la cabeza comparados con sus valores antes y después de la congelación. En conclusión, la selección mediante CGD-BoviPure fue exitosa debido a que mejoró la calidad de los espermatozoides epididimarios caninos frescos y criopreservados. |
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| spelling | oai:dspace.ucuenca.edu.ec:123456789-367932021-09-22T06:00:29Z Evaluación de dos métodos de selección espermática por centrifugación y flotación de esperma canino epididimario fresco y criopreservado Jara Jimbo, Diana Isabel Paredes Quito, Efraín Bernardo Galarza Lucero, Diego Andrés Medicina Veterinaria Criopreservación Genética animal Animales domésticos Zootecnia El presente estudio evaluó dos métodos de selección de espermatozoides epididimarios de perros, uno por centrifugación en gradientes de densidad usando BoviPure (CGD-BoviPure), y otro por Swim-up. Se recuperaron muestras espermáticas de sesenta epidídimos mediante flujo retrógrado usando el diluyente TCG-YH (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% de yema de huevo) y se conformaron veinte pools (3 muestras/pool). La selección espermática se realizó en muestras frescas individuales (n=60) o muestras agrupadas (n=20), ya sea frescas, refrigeradas (24 h) o congeladas-descongeladas (C/D). En cada muestra, un grupo control (sin seleccionar) fue incluido. Todas las muestras fueron evaluadas su cinética-morfometría y la integridad de las membranas espermáticas mediante el sistema CASA, (SCA) y la prueba de fluorescencia PI/PNA-FITC, respectivamente. Los resultados demostraron que CGD-BoviPure fue más efectivo en seleccionar espermatozoides de perro que el Swim-up y control, basado en incremento de la cinética e integridad de membranas plasmática (IMP) y acrosomal (IMA). En muestras individuales, la selección por CGD-BoviPure incrementó (P<0,05) la motilidad total y progresiva (MP), velocidades curvilínea (VCL) y rectilínea (VSL), linealidad (LIN), oscilación (WOB), frecuencia de batida de flagelo (BCF), IMP e IMA. Sin embargo, en muestras agrupadas, la selección por CGD-BoviPure mostró ser efectiva sólo en muestras refrigeradas y C/D, incrementando (P<0,01) la MP, VCL, WOB e IMP. Eficientemente, la selección de los espermatozoides C/D mediante CGD-BoviPure no varió (P>0,05) las dimensiones morfométricas de la cabeza comparados con sus valores antes y después de la congelación. En conclusión, la selección mediante CGD-BoviPure fue exitosa debido a que mejoró la calidad de los espermatozoides epididimarios caninos frescos y criopreservados. The present study evaluated two dog epididymal sperm selection methods, one by BoviPure® density-gradients centrifugation, and the other by conventional swim-up. Sperm samples from sixty epididymides were recovered by retrograde flushing using TCG-EY extender (tris, citric acid, glucose + 20% egg yolk), and twenty pools were conformed (3 samples/pool). The sperm selection procedures were performed on individual fresh samples (n=60) or pooled samples (n=20), either fresh, chilled (24 h), or frozen-thawed (F/T). In each sample, a non-selected control group was included. In all samples, the kinetic-morphometry and sperm membranes integrity were evaluated by the CASA system (SCA®) and PI/PNA-FITC fluorescence test, respectively. The results showed that BoviPure-DGC was more effective in selecting canine sperm than Swim-up and control, based on improving kinetics and integrity of plasma (IPM) and acrosomal (IAM) membranes. In individual samples, the selection by BoviPure-DGC increased (P <0.05) the total and progressive motility (PM), curvilinear (VCL), and rectilinear (VSL) velocities, linearity (LIN), oscillation (WOB), beat-cross frequency (BCF), IPM, and IAM. In pooled samples, the sperm selection by BoviPure BoviPure-DGC, however, was more effective only in chilled and F/T samples, increasing (P <0.01) the PM, VCL, WOB, and IPM values. Efficiently, the selection of F/T sperm samples by BoviPure-DGC did not vary (P> 0.05) the morphometric dimensions of the head compared with its values before and after freezing. In conclusion, the sperm selection by BoviPure-DGC was successful in improving the quality of fresh and cryopreserved dog epididymal sperm. Médico Veterinario Zootecnista Cuenca 2021-09-20T13:42:25Z 2021-09-20T13:42:25Z 2021-09-17 bachelorThesis http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/36793 spa TV;384 Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ openAccess application/pdf 81 páginas application/pdf Universidad de Cuenca |
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