Detección y caracterización fenotípica y molecular de aislados de Escherichia coli O157:H7 de origen canino (Canis lupus familiaris)

Escherichia coli (E. coli) O157:H7 es uno de varios serotipos productores de toxina Shiga que causan enfermedades tanto en humanos como en animales, el organismo probablemente evolucionó a través de la adquisición horizontal de genes para las toxinas Shiga y otros factores de virul...

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Main Author: Vayas Minango, Betty Lorena
Other Authors: Cruz Quintana, Sandra Margarita
Format: masterThesis
Language:spa
Published: Universidad de Cuenca 2021
Subjects:
Online Access:http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/37463
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description Escherichia coli (E. coli) O157:H7 es uno de varios serotipos productores de toxina Shiga que causan enfermedades tanto en humanos como en animales, el organismo probablemente evolucionó a través de la adquisición horizontal de genes para las toxinas Shiga y otros factores de virulencia. El objetivo fue detectar y caracterizar fenotípica y molecularmente aislados de E. coli O157:H7 de origen canino (Canis lupus familairis), se partió de un banco de cepas de E. coli (n = 122) para la detección del serotipo O157:H7 obteniendo 4 muestras positivas, los genes de virulencia hallados en el total de las muestras fueron en primera instancia eaeA 5.74% y hlyA 0.82%, para el caso de stx1 y stx2 no se obtuvieron resultados positivos. Se profundizó en la investigación con la transconjugación de bacterias donadoras y receptoras (Cepa J53) por medio de cultivos, una vez obtenidas las colonias, se realizó los transconjugados con cada bacteria positiva para E.coli O157:H7 y sus respectivos transconjugados (n = 9); se evaluaron los genes de virulencia en el caso de eaeA 88.88%, hlyA 44.44%, y genes de resistencia como: TetA 22.22%, blaTEM 77.77%, blaCTX-M 88.88% por medio de la técnica PCR. Para la detección de los perfiles de resistencia de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) y betalactamasas de tipo AmpC se realizó el método de difusión en disco “Kirby&Bauer” mostrando ser positivas las 8 cepas bacterianas tanto para BLEE como para AmpC; además de hallar resistencia fenotípica para: Cefotaxime 55%, Ciprofloxacina 33%, Enrofloxacina, 44%, Sulfametoxazol/Trimetropim 44%, Ampicilina, Vancomicina y Eritromicina 88%. Este estudio proporciona información acerca de la prevalencia de resistencia antimicrobiana en perros del centro del país.
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spelling oai:dspace.ucuenca.edu.ec:123456789-374632021-11-24T06:00:23Z Detección y caracterización fenotípica y molecular de aislados de Escherichia coli O157:H7 de origen canino (Canis lupus familiaris) Vayas Minango, Betty Lorena Cruz Quintana, Sandra Margarita Medicina Veterinaria Enfermedad animal Bacteria Perros Patología Escherichia coli (E. coli) O157:H7 es uno de varios serotipos productores de toxina Shiga que causan enfermedades tanto en humanos como en animales, el organismo probablemente evolucionó a través de la adquisición horizontal de genes para las toxinas Shiga y otros factores de virulencia. El objetivo fue detectar y caracterizar fenotípica y molecularmente aislados de E. coli O157:H7 de origen canino (Canis lupus familairis), se partió de un banco de cepas de E. coli (n = 122) para la detección del serotipo O157:H7 obteniendo 4 muestras positivas, los genes de virulencia hallados en el total de las muestras fueron en primera instancia eaeA 5.74% y hlyA 0.82%, para el caso de stx1 y stx2 no se obtuvieron resultados positivos. Se profundizó en la investigación con la transconjugación de bacterias donadoras y receptoras (Cepa J53) por medio de cultivos, una vez obtenidas las colonias, se realizó los transconjugados con cada bacteria positiva para E.coli O157:H7 y sus respectivos transconjugados (n = 9); se evaluaron los genes de virulencia en el caso de eaeA 88.88%, hlyA 44.44%, y genes de resistencia como: TetA 22.22%, blaTEM 77.77%, blaCTX-M 88.88% por medio de la técnica PCR. Para la detección de los perfiles de resistencia de betalactamasas de espectro extendido (BLEE) y betalactamasas de tipo AmpC se realizó el método de difusión en disco “Kirby&Bauer” mostrando ser positivas las 8 cepas bacterianas tanto para BLEE como para AmpC; además de hallar resistencia fenotípica para: Cefotaxime 55%, Ciprofloxacina 33%, Enrofloxacina, 44%, Sulfametoxazol/Trimetropim 44%, Ampicilina, Vancomicina y Eritromicina 88%. Este estudio proporciona información acerca de la prevalencia de resistencia antimicrobiana en perros del centro del país. Escherichia coli (E. coli) O157: H7 is one of several Shiga toxin-producing serotypes that cause disease in both humans and animals, the organism likely evolved through horizontal acquisition of genes for Shiga toxins and other virulence factors . The objective was to detect and characterize phenotypically and molecularly isolates of E. coli O157: H7 of canine origin (Canis lupus familairis), starting from a bank of E. coli strains (n = 122) for the detection of serotype O157: H7 obtaining 4 positive samples, the virulence genes found in the total of the samples were eaeA 5.74% and hlyA 0.82% in the first instance, for the case of stx1 and stx2 no positive results were obtained. The investigation was deepened with the transconjugation of donor and receptor bacteria (Strain J53) by means of cultures, once the colonies were obtained, the transconjugates were carried out with each positive bacterium for E.coli O157: H7 and their respective transconjugates (n = 9); Virulence genes were evaluated in the case of eaeA 88.88%, hlyA 44.44%, and resistance genes such as: TetA 22.22%, blaTEM 77.77%, blaCTX-M 88.88% by means of the PCR technique. For the detection of the resistance profiles of extended spectrum beta-lactamases (ESBL) and AmpC-type beta-lactamases, the "Kirby & Bauer" disk diffusion method was performed, showing the 8 bacterial strains to be positive for both ESBL and AmpC; in addition to finding phenotypic resistance for: Cefotaxime 55%, Ciprofloxacin 33%, Enrofloxacin, 44%, Sulfamethoxazole / Trimetropim 44%, Ampicillin, Vancomycin and Erythromycin 88%. This study provides information about the prevalence of antimicrobial resistance in dogs from the center of the country. Magíster en Medicina Canina y Felina Cuenca 2021-11-23T17:27:45Z 2021-11-23T17:27:45Z 2021-11-18 masterThesis http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/37463 spa TM4A;166 Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ openAccess application/pdf 88 páginas application/pdf Universidad de Cuenca
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