| Summary: | El objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la L-carnitina adicionada a
diluyentes de congelación y vitrificación, sobre la criosupervivencia y capacidad
fecundante en esperma epididimario de perro. Para esto, se recuperó el esperma
de 60 epidídimos provenientes de 30 perros adultos orquiectomizados mediante
flujo retrógrado. Posteriormente se conformaron veinte agrupaciones o pools de
esperma (3 muestras epididimarias/pool). Cada pool se dividió en 2 alícuotas, una
para congelación y otra para vitrificación. Para la congelación, se usó el diluyente
TCG-EY (Tris, ácido cítrico, glucosa, 20% yema de huevo) y 5% de glicerol y se
suplementó con 5mM (T1) y 0mM (T2, control 1) de L-carnitina; y para la vitrificación
se usó el diluyente TCG-EY y 250 mM de sacarosa y se suplementó con 5 mM (T3)
y 0 mM (T4, control 2) de L-carnitina. La cinemática, integridad de las membranas y
capacidad fecundante fue evaluada de las muestras espermáticas de los
tratamientos T1, T2, T3 y T4, mediante un sistema computarizado CASA (SCA®-
2018), doble tinción fluorescente PI-PNA-FITC y FIV heteróloga (ovocitos bovinos),
respectivamente. Después de la criopreservación, los resultados demostraron que
el método de congelación produjo valores más altos (P<0,05) de motilidad
progresiva (MP), velocidad curvilínea (VCL) y rectilínea (VSL), y frecuencia de
batida de flagelo (BCF) que el método de vitrificación, independientemente de la
adición de L-carnitina. La L-carnitina no mejoró (P>0,05) ningún parámetro
cinemático de espermatozoides congelados o vitrificados. Sin embargo, L-carnitina,
evidenció un efecto crioprotector debido a un incremento (P < 0,05) del porcentaje
de espermatozoides con membrana plasmática intacta y acrosoma intacto después
del proceso de congelación y vitrificación. En la evaluación de la capacidad
fecundante, se evidenció que las muestras congeladas con L-carnitina obtuvieron
una mayor proporción pronúcleos formados comparados con muestras vitrificadas
sin L-carnitina (P < 0,05). En conclusión, la adición de L-carnitina a los diluyentes
de congelación y vitrificación, demostró un efecto benéfico crioprotector del
plasmalema y acrosoma, incluso de la capacidad fecundante de espermatozoides
epididimarios de perro.
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