| Summary: | La formación de hielo intracelular y extracelular va a depender de la velocidad
de enfriamiento y, en consecuencia, la criosupervivencia espermática. Esta
investigación evaluó la eficacia de un protocolo de criopreservación de dos
rampas de congelación con velocidades de enfriamiento aceleradas frente a dos
protocolos de congelación comercial: uno convencional con velocidades de
enfriamiento desaceleradas, y otro con velocidades programadas con
congelador biológico. Para esto, 24 eyaculados de 4 caballos Árabes
sexualmente maduros fueron recolectados con una vagina artificial, diluidos con
Botusemen Gold® + 5% dimetilformamida, y congelados exponiendo las pajuelas
(0,5 mL) a nitrógeno líquido (NL2) en tres protocolos distintos: [1] PCC-1:
Convencional (Minitube) con 1 rampa de congelación a 5 cm del nivel de NL2
durante 10 minutos; [2] PC2R-2: dos rampas a 17 cm (durante 4 minutos) y 2 cm
(durante 2 minutos) del nivel de NL2 mantenidas dentro de un cryo-box de 31 x
31 x 30 cm (largo, ancho y alto, respectivamente); y [3] PCBP-3: congelador
biológico programable TK-4000 (Tecnología). La nucleación de hielo y la
velocidad de enfriamiento inicial se produjeron a los -13,8ºC a 63,5ºC/min, a -
8,5ºC a 19ºC/min, y a -5,9ºC a -11,4ºC/min, respectivamente en el PCC-1, PC2R2 y PCBP-3. El proceso de criopreservación redujo (P<0,01) los parámetros
cinemáticos e integridad de las membranas espermáticas, independientemente
del protocolo usado. No se registró diferencias significativas (P>0,05) ni en la
cinemática ni en integridad de la membrana plasmática entre protocolos de
congelación. Sin embargo, los protocolos PC2R-2 y PCBP-3 produjeron una
mayor integridad acrosomal post-descongelación comparado con el protocolo
PCC-1. En conclusión, el protocolo PC2R-2 produjo velocidades de enfriamiento
aceleradas y una criosupervivencia de espermatozoides equinos similar a los
protocolos comerciales de congelación convencional o de velocidades
programadas, incluso mejorando la integridad acrosomal. Se recomienda el uso
del protocolo de congelación de dos rampas como alternativa exitosa para
criopreservar espermatozoides equinos debido a su fácil aplicación, eficacia y
menos consumo de NL2.
|
|---|