| Summary: | Se propuso como objetivo de esta investigación evaluar el efecto del KnockOut™
Serum Replacement como sustituto del suero fetal bovino en la producción y
congelación de embriones bovinos producidos in vitro. Se recolectaron ovarios
postmortem y se transportaron al laboratorio Singamia donde se obtuvieron los
complejos ovocito-cúmulo (COCs). Los COCs (n=1798) fueron madurados y
fecundados in vitro (FIV), y los presuntos embriones fueron incubados por 6 días
en un medio de cultivo suplementado con 5% de KnockOut™ Serum Replacement
(KSR; n=589), o 5% de Suero Fetal Bovino (SFB; n=555), o 0,6% de albúmina
sérica bovina (BSA; n=654). En el día 7 luego de la FIV, los embriones fueron
clasificados y los de calidad 1 fueron congelados y almacenados en nitrógeno
líquido. Un grupo de embriones fue descongelado y sometido a una doble tinción
fluorescente (yoduro de propidio y Hoechst) para determinar el número total de
blastómeras, y el número de blastómeras intactas y con alteración de la membrana
plasmática. Otro grupo de embriones fue descongelado e incubado por 72 horas
para determinar la sobrevivencia embrionaria a las 4, 24, 48 y 72 horas postdescongelación. Los embriones cultivados con SFB (P=0,0214) y KSR (P=0,0681)
produjeron mayor porcentaje de blastocistos y menor proporción de mórulas y
blastocistos tempranos que BSA (P<0,05). Del grupo SFB se produjo un
porcentaje mayor de blastocistos regulares que KSR y BSA. Luego de la
descongelación los embriones cultivados con KSR tuvieron menor número y
proporción de células alteradas que los SFB y BSA (P<0,05). La tasa de
reexpansión y eclosión a las 4, 24, 48 y 72 horas fue significativamente menor en
los embriones cultivados con SFB y KSR que con BSA, siendo los de KSR los que
lograron menor tasa de sobrevivencia. En conclusión, con la adición de KSR o
SFB se obtuvo mayor proporción de blastocistos y menor proporción de embriones
en estadios tardíos de desarrollo que BSA. Aunque se observó una menor
proporción de células alteradas en KSR, este grupo y SFB experimentaron menor
tasa de sobrevivencia pos-descongelación que BSA.
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