Summary: | Las proteínas chaperonas son las encargadas de mantener la calidad y funcionalidad de
otras proteínas. Algunas están involucradas en el mantenimiento de la calidad y
funcionalidad de las gametas, entre las cuales se encuentran las chaperonas la familia
HSP70, que se expresan principalmente como respuesta ante situaciones estresantes como
golpes de calor, estrés oxidativo, osmótico, entre otros. Además, miembros de esta familia
también han sido identificadas en la membrana plasmática del espermatozoide y descensos
en su expresión comprometen la motilidad y calidad de los mismos. En vista de estos
antecedentes, este trabajo se enfocó en la producción de las proteínas recombinantes
HSPA1A y HSPA2 de bovinos (Bos taurus) para su evaluación como aditivo en las
soluciones de criopreservación de embriones y gametas. Como resultado, únicamente se
logró obtener la proteína HSPA1A en un modelo de expresión bacteriano, con la cepa de
Escherichia coli (E. coli) Rosetta 2 (DE3) se obtuvo aproximadamente 112 mg de proteína
pura por litro, en los cultivos incubados a una temperatura de 37 °C. Por el contrario, en
cultivos de producción incubados a una temperatura de 30 °C se alcanzó un rendimiento de
± 6 mg de proteína. Por otro lado, no fue posible lograr la producción de la proteína HSPA2,
en consecuencia, de poderse amplificar de la secuencia codificante, por lo que deberá
diseñarse otra estrategia de amplificación y poder así obtener la construcción genética
necesaria para la generación de la cepa recombinante de E. coli capaz de producir esta
proteína.
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