Producción de las proteínas de choque térmico bovinas HSPA1A y HSPA2 en Escherichia coli

Las proteínas chaperonas son las encargadas de mantener la calidad y funcionalidad de otras proteínas. Algunas están involucradas en el mantenimiento de la calidad y funcionalidad de las gametas, entre las cuales se encuentran las chaperonas la familia HSP70, que se expresan principalmente como r...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: Largo Maldonado, Estefany Mishel, Pando Tacuri, Heydi Isabel
Other Authors: Vallecillo Maza, Antonio Javier
Language:spa
Published: Universidad de Cuenca 2024
Subjects:
Online Access:http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/43808
Description
Summary:Las proteínas chaperonas son las encargadas de mantener la calidad y funcionalidad de otras proteínas. Algunas están involucradas en el mantenimiento de la calidad y funcionalidad de las gametas, entre las cuales se encuentran las chaperonas la familia HSP70, que se expresan principalmente como respuesta ante situaciones estresantes como golpes de calor, estrés oxidativo, osmótico, entre otros. Además, miembros de esta familia también han sido identificadas en la membrana plasmática del espermatozoide y descensos en su expresión comprometen la motilidad y calidad de los mismos. En vista de estos antecedentes, este trabajo se enfocó en la producción de las proteínas recombinantes HSPA1A y HSPA2 de bovinos (Bos taurus) para su evaluación como aditivo en las soluciones de criopreservación de embriones y gametas. Como resultado, únicamente se logró obtener la proteína HSPA1A en un modelo de expresión bacteriano, con la cepa de Escherichia coli (E. coli) Rosetta 2 (DE3) se obtuvo aproximadamente 112 mg de proteína pura por litro, en los cultivos incubados a una temperatura de 37 °C. Por el contrario, en cultivos de producción incubados a una temperatura de 30 °C se alcanzó un rendimiento de ± 6 mg de proteína. Por otro lado, no fue posible lograr la producción de la proteína HSPA2, en consecuencia, de poderse amplificar de la secuencia codificante, por lo que deberá diseñarse otra estrategia de amplificación y poder así obtener la construcción genética necesaria para la generación de la cepa recombinante de E. coli capaz de producir esta proteína.