Efecto de la sacarosa, trehalosa y rafinosa en la vitrificación de espermatozoides equinos

Esta investigación evaluó el efecto de diferentes agentes crioprotectores no penetrantes (ACNP) en la vitrificación de espermatozoides equinos. Para ello, se usaron 16 eyaculados de cuatro caballos españoles, recogidos mediante vagina artificial. Cada eyaculado fue diluido con el diluyente Bot...

Full description

Bibliographic Details
Main Authors: León Quinteros, Máximo Emiliano, Sacoto Patiño, Karen Mercedes
Other Authors: Galarza Lucero, Diego Andrés
Format: bachelorThesis
Language:spa
Published: Universidad de Cuenca 2024
Subjects:
Online Access:http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/43812
Description
Summary:Esta investigación evaluó el efecto de diferentes agentes crioprotectores no penetrantes (ACNP) en la vitrificación de espermatozoides equinos. Para ello, se usaron 16 eyaculados de cuatro caballos españoles, recogidos mediante vagina artificial. Cada eyaculado fue diluido con el diluyente Botusemen-Gold® + 1% BSA y dividido en 4 alícuotas para conformar cuatro tratamientos respectivamente, según la congelación o vitrificación con ACNP: congelación convencional (CC, control), y vitrificación con 100 mM sacarosa (VIT-Sa); con 100 mM trehalosa (VIT-Tre); y con 50 mM rafinosa (VIT-Raf). La CC se hizo en vapores de nitrógeno líquido (NL2), mientras que las vitrificaciones sumergiendo gotas de 30 µl directamente en NL2. Los resultados de las muestras espermáticas después de la descongelación y calentamiento demostraron que el tratamiento CC produjo una mayor (P<0,01) motilidad, cinemática e integridad de membranas en comparación con todos los tratamientos de vitrificación. No obstante, los tres tratamientos de vitrificación presentaron mayores valores (P<0,05) de velocidad rectilínea, linealidad y oscilación que el tratamiento CC post descongelación. Por otro lado, los tratamientos VIT-Sa y VIT-Raf mostraron valores más altos (P<0,05) de motilidad total y progresiva e integridad de membranas plasmática y acrosomal en comparación con el tratamiento VIT-Tre después del calentamiento. Finalmente, todos los tratamientos vitrificación y CC incrementaron (P<0.05) el largo y área de la cabeza de los espermatozoides después del calentamiento y descongelación respectivamente, comparado con su referente en fresco. En conclusión, los resultados demostraron que a pesar de que la congelación convencional produjo una mayor criosupervivencia espermática, la vitrificación con sacarosa y rafinosa produjeron una mayor motilidad e integridad de membranas comparadas con la trehalosa, demostrando ser un método atractivo para criopreservar espermatozoides equinos.