Búsqueda de microorganismos con capacidad biopesticida frente a botrytis cinera
RESUMEN Botrytis cinerea es un patógeno capaz de atacar a su hospedador empleando sus estrategias de ataque de múltiples formas, y, cuando se dan las condiciones favorecedoras de la infección, se ponen de manifiesto síntomas que producen grandes pérdidas en los cultivos, como ocurre en la enfermeda...
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Format: | info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
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Published: |
2021
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Subjects: | |
Online Access: | http://hdl.handle.net/10835/9890 |
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author | Esteban Rodríguez, Noelia |
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Botrytis cinerea es un patógeno capaz de atacar a su hospedador empleando sus estrategias de ataque de múltiples formas, y, cuando se dan las condiciones favorecedoras de la infección, se ponen de manifiesto síntomas que producen grandes pérdidas en los cultivos, como ocurre en la enfermedad de la podredumbre gris u oídio.
En este proyecto se realizó un cribado de microorganismos capaces de inhibir el crecimiento del fitopatógeno y así suprimir la enfermedad. Para ello, se emplearon 34 cepas de una colección de Bacillus subtilis con el fin de evaluar su capacidad antagonista frente a B. cinerea, ya que esta bacteria produce moléculas bioactivas capaces de combatir el oídio. El potencial de cada una de las cepas fue evaluado mediante diversos ensayos. Se seleccionaron las cepas que mostraron mayor capacidad antifúngica mediante enfrentamientos duales en placa entre una alícuota de cultivo celular de la bacteria antagonista y el hongo, y entre una alícuota de extracto acelular y el hongo, y, además, se realizó un enfrentamiento en microplaca con pocillos entre la alícuota de cultivo del fitopatógeno y extracto acelular de B. subtilis. Tras esto, en condiciones controladas de laboratorio, se aplicaron cultivos celulares y extractos acelulares sobre hojas de pepino infectadas por el fitopatógeno como medida preventiva, evaluando los daños de manera cualitativa.
Los resultados mostraron que la mayoría de las cepas seleccionadas presentaron una incidencia directa, es decir, cuando el enfrentamiento se producía entre el hongo y la alícuota de cultivo celular de la bacteria antagonista, siendo el porcentaje de inhibición del crecimiento del agente fitopatógeno mayor. Sin embargo, resultó interesante la capacidad de determinados extractos para frenar la enfermedad. En definitiva, Bacillus subtilis es un potente agente de control biológico (ACB) con capacidad biopesticida frente a la enfermedad de oídio.
ABSTRACT
Botrytis cinerea is a pathogen capable of attacking its host using its attack strategies in multiple ways, and, when favorable conditions for infections occur, symptoms that produce large losses in crops are revealed, as happens in the disease of gray rot or powdery mildew.
The aim of this project was to screen from a collection of Bacillus subtilis the microorganisms that were capable to inhibit the growth of the plant pathogen and suppress the disease. For this, 34 strains were used to evaluate their antagonistic capacity against B. cinerea, since these microorganisms produce bioactive molecules capable of fighting powdery mildew. The potential of each of the strains was evaluated through various tests. The strains showing the highest antifungal capacity were selected by means of dual plaque assays between an aliquot of cell culture of the antagonistic bacteria and the fungus, and between an aliquot of acellular extract and the fungus, and, in addition, a microplate confrontation with wells between the culture aliquot of the phytopathogen and acellular extract of B. subtilis. After this, in controlled laboratory conditions, cell cultures and acellular extracts were applied to cucumber leaves that were later infected by the plant pathogen as a preventive measure, evaluating the damage in a qualitative way.
The results showed that most of the selected strains had a direct incidence. When the confrontation occurred between the fungus and the aliquot of cell culture of the antagonistic bacteria, being the percentage of the phytopathogen growth inhibition greater. However, the efficacy to stop the disease by some extract was remarkable. Definitely, Bacillus subtilis is a powerful biological control agent (BCA) with biopesticidal capability against powdery mildew disease. |
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publishDate | 2021 |
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spelling | oai:repositorio.ual.es:10835-98902023-04-12T23:28:21Z Búsqueda de microorganismos con capacidad biopesticida frente a botrytis cinera Esteban Rodríguez, Noelia Moreno Casco, José Joaquín Jurado Rodríguez, Macarena del Mar Trabajo Fin de Grado de la Universidad de Almería Bacillus subtilis Botrytis cinerea cultivo celular extracto filtrado agente de control biológico cell culture acellular extract biological control agent RESUMEN Botrytis cinerea es un patógeno capaz de atacar a su hospedador empleando sus estrategias de ataque de múltiples formas, y, cuando se dan las condiciones favorecedoras de la infección, se ponen de manifiesto síntomas que producen grandes pérdidas en los cultivos, como ocurre en la enfermedad de la podredumbre gris u oídio. En este proyecto se realizó un cribado de microorganismos capaces de inhibir el crecimiento del fitopatógeno y así suprimir la enfermedad. Para ello, se emplearon 34 cepas de una colección de Bacillus subtilis con el fin de evaluar su capacidad antagonista frente a B. cinerea, ya que esta bacteria produce moléculas bioactivas capaces de combatir el oídio. El potencial de cada una de las cepas fue evaluado mediante diversos ensayos. Se seleccionaron las cepas que mostraron mayor capacidad antifúngica mediante enfrentamientos duales en placa entre una alícuota de cultivo celular de la bacteria antagonista y el hongo, y entre una alícuota de extracto acelular y el hongo, y, además, se realizó un enfrentamiento en microplaca con pocillos entre la alícuota de cultivo del fitopatógeno y extracto acelular de B. subtilis. Tras esto, en condiciones controladas de laboratorio, se aplicaron cultivos celulares y extractos acelulares sobre hojas de pepino infectadas por el fitopatógeno como medida preventiva, evaluando los daños de manera cualitativa. Los resultados mostraron que la mayoría de las cepas seleccionadas presentaron una incidencia directa, es decir, cuando el enfrentamiento se producía entre el hongo y la alícuota de cultivo celular de la bacteria antagonista, siendo el porcentaje de inhibición del crecimiento del agente fitopatógeno mayor. Sin embargo, resultó interesante la capacidad de determinados extractos para frenar la enfermedad. En definitiva, Bacillus subtilis es un potente agente de control biológico (ACB) con capacidad biopesticida frente a la enfermedad de oídio. ABSTRACT Botrytis cinerea is a pathogen capable of attacking its host using its attack strategies in multiple ways, and, when favorable conditions for infections occur, symptoms that produce large losses in crops are revealed, as happens in the disease of gray rot or powdery mildew. The aim of this project was to screen from a collection of Bacillus subtilis the microorganisms that were capable to inhibit the growth of the plant pathogen and suppress the disease. For this, 34 strains were used to evaluate their antagonistic capacity against B. cinerea, since these microorganisms produce bioactive molecules capable of fighting powdery mildew. The potential of each of the strains was evaluated through various tests. The strains showing the highest antifungal capacity were selected by means of dual plaque assays between an aliquot of cell culture of the antagonistic bacteria and the fungus, and between an aliquot of acellular extract and the fungus, and, in addition, a microplate confrontation with wells between the culture aliquot of the phytopathogen and acellular extract of B. subtilis. After this, in controlled laboratory conditions, cell cultures and acellular extracts were applied to cucumber leaves that were later infected by the plant pathogen as a preventive measure, evaluating the damage in a qualitative way. The results showed that most of the selected strains had a direct incidence. When the confrontation occurred between the fungus and the aliquot of cell culture of the antagonistic bacteria, being the percentage of the phytopathogen growth inhibition greater. However, the efficacy to stop the disease by some extract was remarkable. Definitely, Bacillus subtilis is a powerful biological control agent (BCA) with biopesticidal capability against powdery mildew disease. 2021-02-19T08:37:20Z 2021-02-19T08:37:20Z 2020-06 info:eu-repo/semantics/doctoralThesis http://hdl.handle.net/10835/9890 es Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 Internacional http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/ info:eu-repo/semantics/openAccess |
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